高光譜/多光譜成像 
光路調(diào)節(jié)相關(guān) 
光學(xué)頻率梳相關(guān) 
熒光 
光學(xué)組件 
激光器|光源 
拉曼測(cè)量 
Libs激光誘導(dǎo)擊穿 
顯微光譜測(cè)量 
量子效率 新聞資訊
濾光片在生物實(shí)驗(yàn)室中是實(shí)現(xiàn)光學(xué)檢測(cè)、熒光成像及光譜分析的核心元件，其通過選擇性透過或阻擋特定波長(zhǎng)的光，滿足不同實(shí)驗(yàn)對(duì)光信號(hào)的精確調(diào)控需求。
濾光片
濾光片在生物實(shí)驗(yàn)中的核心應(yīng)用場(chǎng)景
熒光顯微鏡成像
熒光顯微鏡通過濾光片組合（激發(fā)濾光片、發(fā)射濾光片、二向色鏡）實(shí)現(xiàn)對(duì)特定熒光信號(hào)的捕捉：
- 激發(fā)濾光片：僅允許特定波長(zhǎng)的光通過，用于激發(fā)樣本中的熒光染料。
- 發(fā)射濾光片：阻擋激發(fā)光并透過熒光信號(hào)，避免背景干擾。 例：FITC的發(fā)射峰為525nm，常使用525±15nm的帶通發(fā)射濾光片。
- 二向色鏡：反射特定波長(zhǎng)的激發(fā)光，同時(shí)透過長(zhǎng)波的熒光信號(hào)，實(shí)現(xiàn)光路分離。
流式細(xì)胞術(shù)
流式細(xì)胞儀通過多組濾光片分離不同熒光標(biāo)記的細(xì)胞信號(hào)：
- 帶通濾光片：分離不同熒光染料的發(fā)射光譜，如PE（藻紅蛋白，發(fā)射峰575nm）和APC（別藻藍(lán)蛋白，發(fā)射峰660nm）需搭配575/26nm和660/20nm的濾光片。
- 長(zhǎng)通濾光片：用于初步篩選長(zhǎng)波信號(hào)，如>600nm的濾光片可阻擋短波雜光。
酶標(biāo)儀與光譜分析
- 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定：通過濾光片檢測(cè)特定波長(zhǎng)的吸光度（如450nm檢測(cè)TMB顯色反應(yīng)）。
- 熒光定量PCR：利用濾光片組合區(qū)分不同熒光探針（如FAM、VIC）的信號(hào)，實(shí)現(xiàn)核酸定量。
熒光共振能量轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)
需精確匹配供體熒光團(tuán)（如CFP）和受體熒光團(tuán)（如YFP）的激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)，通過濾光片組合檢測(cè)能量轉(zhuǎn)移效率。
共聚焦顯微鏡與多色成像
- 利用窄帶通濾光片分離高光譜熒光信號(hào)，實(shí)現(xiàn)亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的多色標(biāo)記成像（如GFP、mCherry、DAPI的聯(lián)合檢測(cè)）。
濾光片的選擇與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)邏輯
依據(jù)熒光染料的光譜特性
- 例：若使用Alexa Fluor 594（激發(fā)峰590nm，發(fā)射峰617nm），需搭配590±10nm激發(fā)濾光片和617±15nm發(fā)射濾光片。
- 關(guān)鍵參數(shù)：半帶寬（FWHM）越小，波長(zhǎng)選擇性越高，適用于多色成像（如窄帶通濾光片F(xiàn)WHM<10nm）。
避免光譜重疊干擾
- 多色熒光實(shí)驗(yàn)中，需通過濾光片組合（如添加長(zhǎng)通濾光片）減少不同染料發(fā)射光譜的重疊（如mCherry和Cy5的發(fā)射峰分別為610nm和670nm，可用650nm長(zhǎng)通濾光片分離）。
匹配光源與檢測(cè)設(shè)備
- 激光共聚焦顯微鏡需根據(jù)激光器波長(zhǎng)選擇濾光片（如488nm氬離子激光搭配對(duì)應(yīng)激發(fā)濾光片）。
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